序言

平台特性

平台亮点

商务要点

关联服务

序言

目前,世界上已经构建的噬菌体展示抗体库包括全人天然抗体库、合成抗体库和半合成抗体库等。大多数抗体库仅仅采用几十个供体或合成的抗体基因构建而成,存在库容量低、多样性不足、表达比例低、错配比例高、成药性不足等缺陷,极大的限制了其应用。为了解决上述问题,三优生物利用自己的优势平台,经过长达2年的研发,特推出了“超千亿全人抗体库抗体平台”。

超千亿全人抗体库平台概述

该抗体库项目是对20000多条人天然抗体及150多个已经上市或已完成三期临床的抗体药的大数据分析基础上进行的定向设计,建立在自主开发的展示载体系统之上,抗体基因源自数百亿健康人PBMC细胞。该抗体库项目是对20000多条人天然抗体及150多个已经上市或已完成三期临床的抗体药的大数据分析基础上进行的定向设计,建立在自主开发的展示载体系统之上,抗体基因源自数百亿健康人PBMC细胞。

三优首先建立了百亿级的全人重链抗体子库及百亿级的全人轻链抗体子库。

在此子库的基础上,将重链抗体和轻链抗体进行了随机组合,从而构建出了库容达到千亿的“三优超千亿全人抗体库” 。

该抗体库从设计上提升了“成药性几率高”和“表达水平良好”的种系基因(Germline)的比例,并通过技术革新及全面的质量控制,将抗体库的质量及容量做到了极致水平。

通过数十个靶点的验证表明,通过该抗体库进行筛选,通常可以筛选获得上百个乃至数百个先导抗体分子,所获得先导抗体的亲和力、特异性、类别丰富度等指标均居于国际领先水平。

该抗体库的上线将给抗体发现领域带来重大突破,可广泛应用于创新型抗体药物早期发现、改良型抗体药物开发、诊断检测类抗体发现以及抗体工程改造等领域。将极大的助力于新药研发、疾病诊断和科学研究,协助解决目前优质创新抗体药候选分子“一将难求”的局面,助力重大疾病的精准诊疗,造福病患。

平台特性

1. 全人抗体是抗体药研发的绝对主流

自1985年第一个抗体药物获批以来,获批上市的66种抗体药中(统计截止至本抗体药开始研究设计完成之时),有26种是全人源抗体,约占39%。

而自2015年至今,获批上市的22种单抗中,有12种是全人源抗体,约占54%。2017年,获批上市的6种抗体中,有5种是全人源抗体,约占83%。

由此可见,人源化抗体和全人抗体已成为抗体药的主流。

2. 噬菌体展示技术已成为全人抗体开发的重要途径

目前已获批的26个全人抗体中,通过噬菌体展示抗体库技术获得的抗体共有8种,分别为:Adalimumab、Belimumab、Raxibacumab、Ramucirumab、Necitumumab、Avelumab、Ranibizumab、Durvalumab等,占全人抗体总数的32%。由此可见,噬菌体展示技术已经成为全人抗体药物开发的重要途径。

3. 噬菌体展示全人抗体库已被充分验证

已获批上市的抗体药中,有8种是通过噬菌体展示抗体库技术获得的。而这8种中,又有6种是通过噬菌体展示全人抗体库获得的。除了这8个已上市的抗体药物外,还有至少50个通过全人噬菌体展示抗体库获得的抗体药在不同的临床研究阶段。

由此可见,噬菌体展示全人库是噬菌体展示抗体药物产生的主流技术。

4. 噬菌体展示全人抗体库技术与杂交瘤单克隆抗体的比较优势

在噬菌体展示之前,杂交瘤单抗是抗体产生最主要的技术。噬菌体展示技术逐步发展为抗体发现的主流技术主要是它展现了极大的优势。

杂交瘤单抗技术是将骨髓瘤细胞和免疫淋巴细胞(免疫B淋巴细胞)融合,形成能分泌高度纯一单克隆抗体的技术。

噬菌体展示技术于1990年被首先报道用于抗体库的构建和筛选。

噬菌体展示全人抗体库技术与杂交瘤单克隆抗体的特性比较表

编号 参数 杂交瘤 噬菌体展示抗体库
1 抗体来源 鼠或人 全人
2 库容量 103-104 >1010
3 基因多样性 较差 极高
4 抗体筛选所需时间 3-4个月 3-4周
5 筛选工艺 繁琐 简捷
6 抗体亲和力 低-高
7 动物免疫 需要 不需要
8 成本
9 抗体基因克隆 费时费力 直接获得抗体序列
10 后续改造 费时费力 简单高效
11 轻重链重组

5. 三优超千亿全人抗体库的制备流程

三优超千亿全人抗体库的制备流程如下:

6. 三优超千亿全人抗体库与上市抗体药物的种系基因分布特性高度相似

6.1 三优超千亿全人抗体库与上市抗体药物的重链的种系基因分布特性比较

三优超千亿全人抗体库的重链的种系基因(Germline)的分布特性如下图所示,其中,IGHV1和IGHV3的比例分别为25.4%和61.5%,两者合计占到抗体库总比例的86.9%。

目前已经推进到临床III期或上市抗体药的重链的种系基因(Germline)的分布特性如右图所示,其中,IGHV1和IGHV3的比例分别为38.0%和40.8%,两者合计占到抗体库总比例的78.8%。

由图可知,超千亿全人抗体库的重链的种系基因与已推进到临床III期或上市抗体药的种系基因的分布特性高度相似。

6.2 三优超千亿全人抗体库与上市抗体药物的轻链的种系基因分布特性比较

三优超千亿全人抗体库的轻链的种系基因(Germline)的分布特性如下图所示,其中,IGKV1和IGKV3的比例分别为57.3%和36.4%,两者合计占到抗体库总比例的93.7%。

目前已经推进到临床III期或上市抗体药的重链的种系基因(Germline)的分布特性如右图所示,其中,IGKV1和IGKV3的比例分别为45.8%和23.9%,两者合计占到抗体库总比例的79.7%。

由图可知,超千亿全人抗体库的轻链的种系基因与已推进到临床III期或上市抗体药的种系基因的分布特性高度相似。

7. 三优超千亿全人抗体库与IMGT数据库中全人抗体的 CDR3 的长度高度相似

7.1三优超千亿全人抗体库与IMGT数据库中全人抗体的重链的CDR3的长度比较

三优超千亿全人抗体库与IMGT数据库中全人抗体的重链的CDR3的长度比较如下图所示,由图可知,三优超千亿全人抗体库与IMGT数据库中全人抗体的重链的CDR3的长度高度相似。

7.2三优超千亿全人抗体库与IMGT数据库中全人抗体的轻链的CDR3的长度比较

三优超千亿全人抗体库与IMGT数据库中全人抗体的轻链的CDR3的长度比较如下图所示,由图可知,三优超千亿全人抗体库与IMGT数据库中全人抗体的轻链的CDR3的长度高度相似。

8. 三优超千亿全人抗体库所筛出抗体具有抗体数量多、亲和力高,交叉活性分子多、易筛到功能分子等特性

8.1 先导抗体数量统计

通过17个靶点对三优超千亿全人抗体库进行了筛选验证,共获得了1711个具有独特序列的抗体克隆。部分项目可达300多个独特序列的抗体克隆。

8.2 先导抗体的亲和力分析

通过三优超千亿全人抗体库筛选获得的抗体的亲和力往往可以达到pM-SubnM之间。下图是一个案例项目的6个优选抗体克隆的亲和力分析,6个优选抗体克隆的亲和力基本在1.75-6.07nM范围内。

8.3 先导抗体对人、鼠、猴蛋白的交叉活性分析

三优超千亿抗体库可应用于筛选人、鼠、猴蛋白的交叉活性。下图是一个案例项目的18个先导抗体克隆的对人、鼠、猴的交叉活性分析。由图可知,大多数先导抗体对人、鼠、猴均有较好的交叉识别活性。

8.4 细胞水平的结合、阻断及激活活性分析

下图是一个案例项目采用FACS分析抗体与细胞表面蛋白的结合活性,基于FACS分析抗体对受体配体结合的阻断及激活活性。由图可知,所获得的16个先导抗体克隆均展现了良好的细胞水平的结合活性;14个抗体中,有8个抗体展现了良好的激活活性,有5个抗体展现了良好的阻断活性。优选抗体克隆展现了和对照抗体相似的阻断活性。

8.5 其他功能及动物模型验证

目前一系列利用该超千亿抗体库获得的先导抗体的体外功能及动物模型验证正在进行中。

平台亮点

●  源自天然,辅以工程设计

●  任意靶点均可快捷筛选

●  上百抗体广泛覆盖表位

●  亲和力高提升成功概率

●  一体化服务加速研发进程

●  高性价比服务降低客户风险

商务要点及使用流程

超千亿抗体库的筛选周期:一般1-2个月

超千亿抗体库的商务模式:开放式的平台,可根据客户需要提供个性化的服务。


超千亿抗体库的使用流程

超千亿抗体库的使用流程如下:抗体库选择à抗原鉴定à海选(通常进行3轮海选)à亲和及功能筛选

1)抗体库选择

三优超千亿抗体库有A、B、C、D、E、F六个子库,各个子库的库容介于100亿-400亿之间。本次上线的为A、B、C、D四个库。

2)抗原鉴定

通常采用重组蛋白作为筛选抗原,直接针对有高级结构的抗原表位开发抗体。

针对客户提供重组蛋白,三优生物采用SDS-PAGE、Elisa或FACS抗原抗体结合活性、等方法对抗原进行了严格的质量控制,确保了抗原的质量。

对于不能自己提供重组蛋白的客户,三优生物配套有完善蛋白质真核表达技术平台,可帮助客户完成蛋白质制备。

3)海选

三优生物已建立了免疫管包被抗原筛选法、磁珠偶联抗原筛选法、细胞基础上的抗体筛选法等多种抗体海选方法。可根据靶点特性选择合适的抗体海选方法。

4)亲和筛选及功能筛选

三优生物已建立了一体化的抗体亲和筛选服务平台。可根据项目需求,采用FACS、Elisa等进行蛋白水平或细胞水平的亲和筛选。亲和筛选后,再根据项目需求,制备样品,完成功能筛选。


以免疫管包被抗原法为例,抗体海选的过程如下图所示:




关联服务

多种抗体库组合,
只为一个最优抗体。

三优生物利用噬菌体展示技术,打造了磁阵列免疫抗体库,超千亿全人抗体库,超千亿单域抗体库等针对不同需求的多种抗体库服务。利用抗体库筛选抗体,可以从数亿抗体分子中选出顶级亲和力抗体,特异性更高的优选抗体,为抗体药物研发奠定最坚实的基础。

极致抗体工程改造,
带来非凡体验。

三优生物利用基因工程抗体库技术,对候选抗体的CDR区进行定点突变、组合突变、随机突变等抗体工程改造。从而可以打造出具有极致亲和力的改造抗体,提高待选抗体与抗原亲和力。

Copyright © 2015 All rights reserved 三优生物医药(上海)有限公司  沪ICP备:15044189号-1